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Roche 潮霉素B溶液生物试剂

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王春华
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  • 发货地  北京
  • 供货总量  100 个
  • 品 牌  sigma,gibco,hcylong,abcam,
本公司优质供应
  • 经营模式|生产型,服务型
  • 注册资本|未填写
  • 企业类型|个体经营(生产型,服务型)
  • 主营产品|血清,培养基,耗材,试剂盒,lif
  • 公司地区|北京
  • 公司荣誉| 明星产品
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品牌sigma,gibco,hcylong,abcam, 有效期至长期有效 最后更新2020-06-11 17:56
产品规格1g(20ml) 产品用途生化研究

Roche 潮霉素B溶液生物试剂

产品规格 1g(20ml)
产品用途 生化研究
级别 超纯、高纯
颜色 其他
用途范围 潮霉素B是由吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)代谢产生的一种氨基糖苷
含量 99.9
分类 抗生素
CAS Roche 10843555001
包装类型
外观性状 液体
品牌 Roche 潮霉素B溶液

我公司长期供应常规性的生物试剂,耗材批发零售。秉承质量第一 信誉至上 售后完善 以客户标准为原则,为新老客户提供一个值得信任的平台。各种优势产品:life (脂质体2000,3000),Gelred(核酸染料) 。Trizol,TRIzol? LS 。罗氏潮霉素B。 二甲基亚砜(DMSO)。HyClone培养基。gibco 双抗   B27  胎牛血清( 16000-044)  胎牛血清( 10099-141)  等。 CST ,ABcam ,santa抗体。日本同仁CCK-8试剂盒。西班牙琼脂糖。另有 sigma,amresco原装试剂大量现货。以上报价均为市场报价,仅供参考。欢迎新老客户咨询选购!13521765672

 


作用机制:  

潮霉素B是由吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素,通过抑制蛋白质合成而杀死细菌、真菌和高等真核细胞。潮霉素B通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而抑制蛋白合成。目前常用于筛选和维持培养含潮霉素抗性基因的原核或真核细胞。 

抗性基因: 

对潮霉素B的抗性源自编码潮霉素B磷酸转移酶(Hph)的基因。至今发现两种来源: 

Streptomyces hygroscopicus产生的Hph抗性基因;

Escherichia coliKlebsiella pneumoniae内质粒携带的Hph抗性基因(常用);  

生物应用: 

1)   筛选和维持培养稳定转染Hph+载体的原核细胞或真核细胞(植物细胞和哺乳动物细胞); 

2)   由于作用模式的差异,常与G418 (GeneticinTM),Zeocin? 和blasticidin S联合使用,筛选稳定转染两个不同载体的细胞株;


双抗性稳定转染细胞筛选的抗生素作用机制及抗性

抗生素

抗性机制

抗性基因

哺乳动物筛选浓度

潮霉素B

干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读

Hph

200~500μg/mL

G418

干扰80S核糖体功能和抑制蛋白合成

Tn5/Tn601

100~1000μg/mL

Zeocin

掺入或者切割DNA引起细胞死亡

Sh ble

50~100μg/mL

blasticidin S

核糖体上抑制肽键形成

Bsd/BSD

3~50μg/mL


3)抗病毒剂,由于潮霉素B选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞,而且具有抑制翻译的功效;

4)作为驱虫药加入动物饲料; 

应用浓度: 

潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化。推荐使用浓度为50-1000 μg/mL,最佳浓度需要杀灭曲线来确定。 

哺乳动物细胞·200-500 μg/mL;细菌/植物细胞·100-300 μg/mL;真菌·300-1000 μg/mL; 

产品使用:

使用一:杀灭曲线确定最佳杀死浓度(仅作参考,因个人检测体系而异)

(1)往组织培养级的96孔板内加入未转染细胞,细胞密度约50-200细胞/孔;细胞贴壁之后,往每孔加入含不同浓度(如50-1000μg/mL,至少5个浓度)潮霉素B的200μL新鲜培养基;

(2)37℃,5% CO2培养箱孵育细胞10-14天;

(3)培养5-7天后更换新的培养液,培养液内含有相应浓度的潮霉素B;

(4)10-14天后使用细胞增殖方法如MTT,CCK-8等评估细胞活力;也可以通过检测细胞克隆数或百分比汇合率来确定毒性效应。一般选择在10-14天能够杀死所有细胞的最小浓度为最佳筛选浓度。

使用二:筛选稳定转染细胞

(1)         对于贴壁细胞,直接吸去60mm培养皿内的转染细胞培养基,然后加入含有潮霉素B的新鲜培养基5-6ml;对于悬浮细胞,无菌条件250x g,离心10min除去旧的转染细胞培养基,然后悬浮在约5ml的含潮霉素B的新鲜培养基;

(2)         5-7天后,如上方法更换含有潮霉素B的新鲜培养基;

(3)         再孵育细胞5-7天;

(4)         10-14天孵育后,培养体系中只含有能够表达潮霉素B抗性表型的活细胞。因此筛选之后如步骤一,更换不含潮霉素B的新鲜培养基。 


保存方法:溶液直接存放在2℃~8℃,至少存放1年。


供应商信息
公司名 赛因百奥生物技术(北京)有限公司 经营模式生产型,服务型
注册资本未填写 公司注册时间2014
公司所在地北京 企业类型个体经营 (生产型,服务型)
保 证 金已缴纳 0.00
主营行业化学试剂  , 化学试剂 / 生化试剂  , 
主营产品或服务血清,培养基,耗材,试剂盒,lif
联系方式






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