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豚鼠组胺(HIS)elisa检测试剂盒

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王琳
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  • 发货地  上海
  • 发货期限  3天内发货
  • 品 牌  上海莼试
本公司优质供应
  • 身份验证|
  • 注册资本|50万人民币
  • 企业类型|个体经营
  • 主营产品|主营产品/服务:ELISA试剂盒,生物试剂,omega试剂盒,QIAGEN试剂盒,动物血清,标准品,对照品,抗体,细胞
  • 公司地区|上海
  • 公司荣誉| 已通过认证 VIP第1年:1级
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品牌上海莼试 有效期至长期有效 最后更新2021-03-26 17:08
≥99.0%10CM*20CM

豚鼠组胺(HIS)elisa检测试剂盒

豚鼠组胺(HIS)elisa检测试剂盒实验原理:

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人总胆汁酸(TBA)水平。用纯化的人总胆汁酸(TBA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入总胆汁酸(TBA),再与HRP标记的总胆汁酸(TBA)体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的总胆汁酸(TBA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人总胆汁酸(TBA)浓度。

试剂盒组成:

试剂盒组成

48孔配置

96孔配置

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说明书

1份

1份



封板膜

2片(48)

2片(96)



密封袋

1个

1个



酶标包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

标准品:13.5μmol/L

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶

2-8℃保存

标准品稀释液

1.5ml×1瓶

1.5ml×1瓶

2-8℃保存

酶标试剂

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

样品稀释液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

显色剂A液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

显色剂B液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

终止液

3ml×1瓶

6ml×1瓶

2-8℃保存

20倍浓缩洗涤液

20ml×1瓶

30ml×1瓶

2-8℃保存

豚鼠组胺(HIS)elisa检测试剂盒样本处理及要求:

1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

操作步骤

1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为9μmol/L,6μmol/L ,3μmol/L,1.5μmol/L, 0.75μmol/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂***μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

豚鼠组胺(HIS)elisa检测试剂盒注意事项:

1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排***加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6. 底物请避光保存。

7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。


计算:

以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标, 

在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD 

值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释 

倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标 

准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值 

代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释 

倍数,即为样品的实际浓度。 




供应商信息
公司名 上海莼试生物技术有限公司 经营模式
注册资本50万人民币 公司注册时间2016
公司所在地上海 企业类型个体经营 ()
保 证 金已缴纳 0.00 资料认证  企业资料通过认证
主营行业化学试剂  , 化学试剂 / 化学试剂  , 化学试剂 / 生化试剂  , 
主营产品或服务主营产品/服务:ELISA试剂盒,生物试剂,omega试剂盒,QIAGEN试剂盒,动物血清,标准品,对照品,抗体,细胞
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